Калькулятор концентрації білка

Автор: Henrick Yau

Калькулятор концентрації білка

Типові значення коливаються від 0.5 до 2.0
Стандартні кювети мають довжину шляху 1 см
Якщо зразок був розведений перед вимірюванням (наприклад, 5 = розведення 1:5)

Концентрація білка за допомогою поглинання при 280 нм (A280) визначається за законом Бугера-Ламберта-Бера:

\[ C = \frac{A}{\epsilon \times l} \]

де:

  • \( C \) = Концентрація білка (мг/мл)
  • \( A \) = Поглинання при 280 нм
  • \( \epsilon \) = Коефіцієнт екстинкції (л·г⁻¹·см⁻¹)
  • \( l \) = Довжина оптичного шляху кювети (см)

Що таке калькулятор концентрації білка?

Калькулятор концентрації білка допомагає визначити концентрацію білка за допомогою різних методів, зокрема:

  • Поглинання при 280 нм (A280): Швидкий і неруйнівний метод, заснований на ароматичних амінокислотах.
  • Метод Бредфорда: Колориметричний метод, що використовує зв'язування барвника.
  • Метод BCA (біцинхонінової кислоти): Метод, що базується на відновленні міді та колориметричному виявленні.
  • Метод Лоурі: Добре відомий підхід, що використовує взаємодію білка з міддю.

Як користуватися калькулятором

Виконайте ці кроки, щоб розрахувати концентрацію білка:

  • Виберіть метод вимірювання (A280, Бредфорд, BCA або Лоурі).
  • Введіть необхідні значення, такі як поглинання, коефіцієнт розведення та коефіцієнт екстинкції (якщо потрібно).
  • Якщо використовується метод стандартної кривої (Бредфорд, BCA або Лоурі), введіть параметри кривої.
  • Натисніть кнопку "Розрахувати", щоб отримати результат концентрації.

Переваги використання калькулятора

  • Економить час, автоматизуючи розрахунки концентрації.
  • Підтримує кілька методів вимірювання для гнучкості.
  • Включає калькулятор розведення для приготування конкретних концентрацій.
  • Зменшує ймовірність людської помилки при ручних розрахунках.

Поширені запитання

1. Наскільки точним є метод поглинання (A280)?

Метод A280 загалом точний для чистих білків, але на нього можуть впливати забруднювачі, такі як нуклеїнові кислоти.

2. Чи можна використовувати метод Бредфорда для всіх білків?

Метод Бредфорда добре працює для більшості білків, але може давати різні результати залежно від складу білка.

3. Яка перевага методу BCA?

Метод BCA більш сумісний з детергентами та має ширший лінійний діапазон, ніж метод Бредфорда.

4. Як вибрати правильний коефіцієнт екстинкції для A280?

Використовуйте опубліковані значення для відомих білків або розрахуйте коефіцієнт екстинкції на основі амінокислотного складу.

5. Чому потрібен коефіцієнт розведення?

Якщо ваш зразок був розведений перед вимірюванням, ви повинні помножити розраховану концентрацію на коефіцієнт розведення, щоб отримати правильну кінцеву концентрацію.